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一.【產(chǎn)品名稱】通用名稱：牙質(zhì)片層培養(yǎng)基

二.牙質(zhì)片層【包裝規(guī)格】50片/包

三.牙質(zhì)片層【預期用途】用于破骨細胞的培養(yǎng)。

骨切片檢測能與從實驗動物（包括小鼠、大鼠、雞、兔和貓）的骨分離的破骨細胞同時使用。它已被廣泛用于研究通過直接分離于骨或培養(yǎng)自骨髓培養(yǎng)基的人破骨細胞重吸收 (4)。該領(lǐng)域當今主要優(yōu)勢之一是通過RANK配基的增加從外周紅細胞誘導破骨細胞形成的技術(shù)的發(fā)展(9)。利用這項技術(shù)，大量功能性破骨細胞能被激活，被激活的功能性破骨細胞將在包括骨位點重吸收的牙質(zhì)片層在內(nèi)的礦化底層挖掘出重吸收間隙。重吸收很容易被反射光顯微鏡方法而量化。

四.牙質(zhì)片層【產(chǎn)品簡介】

牙質(zhì)片層以50片一包形式供應，包裝于已消毒的旋轉(zhuǎn)蓋封容器內(nèi)。該片層通過紫外線殺菌并且只能在無菌環(huán)境（如層流柜）中打開。

失活的牙質(zhì)片層用作骨重吸收培養(yǎng)基。這些片層以5 mm直徑的牙質(zhì)薄片形式提供（正常厚度為0.3 mm）。每批培養(yǎng)基均經(jīng)過檢測以確保被有功能的破骨細胞重吸收。另可提供預重吸收的樣品片層以便于體外重吸收功能鑒定.

五.牙質(zhì)片層【檢驗原理】

該產(chǎn)品被設計利用“骨切片檢測”以實現(xiàn)體外骨重吸收量化(1,2)，在“骨切片檢測”中，培養(yǎng)的破骨細胞在礦化的底層挖掘出真正的骨重吸收間隙。從該檢測的*個表述開始，在過去的16年間(1,2)，該檢測已被廣泛地應用于研究許多因素對骨重吸收的影響且是當今體外骨重吸收研究使用zui廣泛的方法。

六.牙質(zhì)片層【儲存條件及有效期】

該產(chǎn)品可在室溫下儲存。如果容器不打開且片層保持干燥，在保質(zhì)期內(nèi)不會出現(xiàn)變質(zhì)。

七.【適用儀器 】適用于培養(yǎng)箱使用。

八.【樣本要求】使用前取樣。

九.【檢驗方法】

1. 牙質(zhì)片層在已消毒的塑料容器中提供。僅允許在無菌環(huán)境（如層流柜）中打開。
2. 打開容器后，需使用消毒鑷子移開消毒棉塞。然后片層應通過顛倒試管轉(zhuǎn)移至已消毒的皮氏培養(yǎng)皿。
3. 用細鑷子將片層移至培養(yǎng)皿備用，注意不要刮到牙質(zhì)表層。該片層被設計可應用在標準的96孔組織培養(yǎng)盤中，但是它們也能在任何類型的組織培養(yǎng)容器中使用。
4. 在增加細胞之前，牙質(zhì)片層應被預加濕至少1小時。應使用消毒磷酸鹽緩沖液或組織培養(yǎng)方法。
5. 去除預加濕液后，加入細胞懸濁液。加入的細胞數(shù)量取決于破骨細胞來源和實驗設計。重吸收由光顯微鏡法進行分析，這樣就有可能測量單個破骨細胞的活性。然而，在大部分實驗方案中，加入更多的破骨細胞將更合適（但是一般要少于200/牙質(zhì)片）。
6. 使用的沉淀時間也取決于破骨細胞來源和實驗設計。成熟的破骨細胞將在1小時內(nèi)附在牙質(zhì)片層，但是在許多方案中將需要更長的沉淀時間。培養(yǎng)基能通過使用包括自動移液管在內(nèi)的標準組織培養(yǎng)技術(shù)和設備而被改變。
7. 由成熟破骨細胞導致的重吸收在培養(yǎng)12小時后可被檢測出。培養(yǎng)的時間將取決于實驗設計。
8. 如果使用液態(tài)固定液，牙質(zhì)片層可在組織培養(yǎng)容器中固定。撤除受限的培養(yǎng)基且用磷酸鹽緩沖液或組織培養(yǎng)基沖洗組織培養(yǎng)孔兩次，再加入固定液。常使用的固定液是4%的戊二醛（用0.2M的甲胂酸鈉溶液配成）。
9. 重吸收凹點能在多種標準組織學菌株著色后鑒定。我們推薦1%的甲苯胺藍（用0.5%四硼酸鹽溶液配成）。牙質(zhì)片層應在此甲苯胺溶液中染色3分鐘。多余的染料通過沖洗去除，然后在非蒸餾水中漂洗并風干。已染色的片層可即在室溫下長期保存。
10. 重吸收陷窩能通過多種途徑鑒定，包括掃描電鏡和光學顯微鏡。我們推薦使用反射光學顯微鏡。
11. 使用者應考慮一些推薦的方法以確定zui合適他們需要的技術(shù)。